TG1感受态细胞

储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。不适合在液氮中保存。

产品介绍：

TG1菌株来源于大肠杆菌K-12，主要用于噬菌体展示（Phage Display），也可进行M13噬菌体相关的实验，也可用于普通质粒的克隆构建及提取。lacZΔM15的存在可进行α互补原理上的蓝白斑筛选实验。由于该菌株不含核酸酶endA1突变，提取的质粒中核酸酶含量较高，需用去蛋白液处理。TG1感受态细胞由特殊工艺制成，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg DNA。

基因型：supE thi-1 _(lac-proAB) _(mcrB-hsdSM)5(rK– mK–) [F´ traD36 proAB lacIqZ _M15]

菌株抗性：对氨苄青霉素、卡那霉素、壮观霉素、博莱霉素、庆大霉素、氯霉素和四环素敏感。

质粒转化步骤：（以氨苄青霉素抗性的pUC19质粒为例）

1.将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入1-5μl含有1-100ng的质粒DNA到细胞中，用手指拨打管底，轻轻混匀。

2.冰水浴中放置30分钟，不要晃动。

3.42℃热击60秒钟，不要晃动。

4.冰水浴中放置2分钟，不要晃动。

5.加入500μl的室温的SOC或LB培养基。

6.置于37℃摇床中，150-200rpm，复苏培养60分钟。

7.取50-100μl菌液涂布在含有氨苄青霉素抗性的LB平板上。待液体吸干后，倒置平板37℃培养12-24小时。

（平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm离心30秒钟，弃掉上清，留100μl左右的液体，用200μl吸头轻轻吹打散菌块，取10μl重悬的菌液分多点滴在平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更大的单克隆菌落。）

（具体详见说明书）